A = εLc

Beer-Lambert의 법칙을 살펴보면, 흡광도와 농도가 선형적이라는 것을 알 수 있다. 이를 이용하여, 농도를 알고 있는 표준 물질의 흡광도를 측정한 후, 검정곡선을 작성할 수 있다.

실험 도구

실험 과정(Experimental Procedure)

가.    알루미늄 표준용액 만들기

1)      10 mg/L의 알루미늄 표준 용액을 만든다.(10 ppm)

2)      1) 의 표준용액을 10배 희석하여, 1 ppm 표준용액으로 만든다.

1) 의 표준 용액 1 mL + 증류수 9 mL를 섞어서 1 ppm 표준용액을 만든다.

3)      2) 의 용액을 이용하여, 다음 표와 같은 용액을 만든다.

나.    시약 만들기

1)      각 시험관에 ECR Reagent pillow를 하나씩 넣는다.

2)      1) 의 용액에 각각 Hexamethyleneretramine Buffer Reagent pillow를 하나씩 넣는다.

3)      10 mL가 들어있는 농도가 가장 낮은 sample cell에 ECR Masking Reagent solution을 한 방울 넣는다. 이 시약이 Reference이다.

다.    흡수 스펙트럼 측정하기

1)      SpectraAcademy를 흡수/투과모드로 배열한다. 

2)      SpectraAcademy와 PC를 USB cable을 이용하여 연결한 후, “Go 버튼”을 .클릭하여 측정을 시작한다.

3)      Light source에 전원을 연결하고, 전원 스위치를 ON 시킨다. 그리고 UV/VIS 전원도 ON 시킨다.

4)      광원의 안정화를 위해서, UV/VIS 전원을 ON시킨 상태에서 30분간 예열한다

5)      SpectraAcademy의 SW인 VisualSpectra 2.1 Sr을 실행시킨다.

6)      UV/VIS 광원을 ON으로 놓고, Shutter를 ON 시킨다.

7)      Cuvette에 Reference 물질을 넣고, SpectraAcademy의 cuvette holder에 cuvette을 넣은 후, Spectrum의 최고값이 14,000 counts가 오도록 Integration time을 조절한다.

8)      그리고 "REFER" 버튼을 눌러, Reference를 측정한다.

9)      Shutter를 OFF 시킨 후, Reference를 측정할 때와 같은 Average, Boxcar, Integration time 값을 유지한 채, Dark를 측정한다.("DARK"버튼을 클릭한다)

10)   나.에서 만들었던 용액을 cuvette에 넣어 흡광도를 측정한다.

11)   VisualSpectra 2.1 Sr에서 "ABSOR." 버튼을 누르면, 흡광도 모드로 스펙트럼을 볼 수 있다.

12)   SpectraAcademy의 Quantitative analysis 기능을 이용하여, 검정곡선(Calibration curve)의 상수(coefficients)를 결정한다.

실험 결과(Results)

가. 흡수 스펙트럼

       나. Calibration Coefficients 및 Calibration Curve